Das Designer-Enzym LunaScript Reverse Transkriptase: schneller, heißer, zuverlässiger!
Die LunaScript Reverse Transkriptase ist ein maßgeschneidertes, neuartiges in silico Designer-Enzym, das Ihnen eine unerreichte Performance bietet. LunaScript arbeitet besonders schnell und zuverlässig auf quasi allen RNAs und Input-Mengen und ist optimiert für höhere Inkubationstemperaturen. So können selbst schwierige RNA-Sekundärstrukturen aufgeschmolzen und zuverlässig in cDNA umgeschrieben werden.
Die LunaScript Reverse Transkriptase erhalten Sie in drei verschiedenen Formaten – für maximale Flexibilität bei der cDNA-Synthese.
- Einfacher, anwenderfreundlicher Reaktionsansatz, dank optimierter SuperMix/Master Mix/ Multiplex-Formate für verschiedene Anwendungen
- Schnellste cDNA-Synthese in < 15 min
- Problemlose Analyse von RNAs mit Sekundärstrukturen dank erhöhter Reaktionstemperatur von 55°C (bis 65°C)
- Mit No-RT Kontrolle – für noch mehr Sicherheit gegen unspezifische Reaktionen
- Inerter blauer Farbstoff im Master Mix schützt vor Pipettierfehlern
- Exzellente Sensitivität, Linearität und Zuverlässigkeit
Mit nur 13 min bietet Ihnen LunaScript die schnellste Erststrang-cDNA-Synthese auf dem Markt!
Vergleich der Herstellerempfehlungen für die cDNA-Synthese. Sowohl das LunaScript RT SuperMix Kit (#E3010) als auch das LunaScript RT Master Mix Kit (#E3025) ermöglichen Ihnen die kürzesten Protokollzeiten und tolerieren die höchsten Temperaturen, die zum sicheren Aufschmelzen inhibierender RNA-Sekundärstrukturen benötigt werden.
Die LunaScript Reverse Transkriptase erhalten Sie in drei praktischen Formaten:
a.) Der LunaScript RT SuperMix – Erste Wahl bei qPCR (#E3010 – inkl. Negativ-Kontrolle, #M3010 – SuperMix allein)
Der LunaScript RT SuperMix Kit (#E3010) ist ideal für die perfekte cDNA-Synthese im RT-qPCR Kontext. Der Kit umfasst das Enzym vorgemischt im optimierten Puffer inkl. dNTPs, RNase Inhibitor, Random-Hexamer- und Oligo-d(T)-Primer. Sie geben lediglich Ihr RNA-Template hinzu. Außerdem im Kit enthalten: separates Vial mit Nuklease-freiem Wasser sowie ein Primerset als “No-RT-Control” Negativ-Kontrolle.
Unser Spar-Tipp:
Für Kunden, die nicht jedes Mal eine “No-RT-Control” durchführen müssen, bieten wir das Produkt auch in der “Budget-Variante” (als LunaScript RT SuperMix #M3010) ohne Wasser und Kontrollprimerset an. Ebenfalls ist dieser LunaScript RT SuperMix #M3010 auch in größeren Gebinden mit interessantem, volumenabhängigen Preisvorteilen erhältlich.
Wie immer Sie sich entscheiden: Stets erhalten Sie Best-in-Class Performance und besonders einfache und anwenderfreundliche Protokolle. Der inerte blaue Farbstoff im SuperMix hilft Ihnen dabei, Pipettierfehler zu vermeiden.
Anwendungen:
- Herstellung von erstklassigen cDNAs für anschließende qPCR Ansätze
- Herstellung von cDNAs für ONT SARS-CoV-2 Seq Ansätze
b.) Das „universelle“ LunaScript RT Master Mix Kit (Primer-frei) (#E3025)
Das Best-in-Class LunaScript Enzym ist auch im Master Mix ohne Primer (#E3025) verfügbar. Sie können wahlweise random Primer, oligo dT Primer oder Gen-spezifische Primer zugeben. So profitieren Sie von der maximalen Flexibilität bei der cDNA-Synthese.
Anwendungen:
- Geeignet für schnelle und zuverlässige cDNA-Synthese von Molekülen bis zu 9 kb Länge
- Optimal als universelles Endpunkt cDNA-Synthese-Kit für RT-PCRs, RT-qPCRS oder RNA-seq Experimente
c) Das „high-fidelity“ LunaScript Multiplex One-Step RT-PCR Kit (#E1555)
Das LunaScript Multiplex One-Step RT-PCR Kit bietet ein optimiertes Protokoll für cDNA-Synthese und PCR-Amplifikation in einer einzigen Reaktion. Die duale Temperaturkontrolle der Enzymaktivitäten durch Aptamer-Technologie ermöglicht es Reaktionen bei Raumtemperatur anzusetzen und für bis zu 24h bei Raumtemperatur zu lagern. Dank der 25x Konzentration des Enzym Mixes ermöglicht das Kit perfekte RT-PCRs von bis zu 50-plex Amplikons bei 3 kb Länge. Neben dem RNA-Template geben Sie lediglich die gewünschten RT- und PCR-Primer zu und erhalten hochspezifische, „fehlerfreie“ Amplifikate.
Anwendungen:
- Geeignet für sensitive und genaue One-Step RT-PCR Anwendungen bis 3 kb Fragmentlänge
- Sowohl Single-Plex als auch bis über 50-plex Amplifikationen sind möglich
Der LunaScript RT SuperMix (#E3010 oder #M3010) bietet Ihnen unerreichte Sensitivität, Linearität und Reproduzierbarkeit in 2-Schritt-RT-qPCR Reaktionen.
RNA wurde mit dem 1X LunaScript RT SuperMix in 20 µl Ansätzen unter den empfohlenen „Standard“ Bedingungen zu cDNA umgeschrieben (25°C/2 min, 55°C/10 min, 95°C/1 min). Die gewonnene cDNA wurde anschließend mit dem Luna Universal qPCR Master Mix (#M3003) und 1 µl der cDNA quantifiziert, jeweils in Triplikaten.
A. Input = Verdünnungsreihe mit Jurkat total RNA (1 µg – 1 pg) umgeschrieben in cDNA und anschließender Quantifizierung des β-actin-Gentranskripts mittels qPCR.
B. Input = Verdünnungsreihe mit ERCC (External RNA Controls Consortium) Mix1 RNA (5×10^9 bis 50 Kopien, entsprechend ~10 ng bis 10 fg) umgeschrieben in cDNA und anschließende Quantifizierung des Transkripts ERCC-00130 mittels qPCR.
Der LunaScript SuperMix ist der Konkurrenz in Zuverlässigkeit und Linearität auf allen getesteten RNAs deutlich überlegen.
Kommerziell erhältliche cDNA-Synthese Supermixe wurden nach Empfehlung des Herstellers eingesetzt, um cDNA von 1 µg – 100 pg humaner (Jurkat) Gesamt-RNA zu generieren. Die resultierenden cDNAs von 8 unterschiedlichen Targets (variierend in Menge, Länge und GC-Gehalt) wurden anschließend per qPCR mit dem Luna Universal qPCR Master Mix (#M3003) bzw. Luna Universal Probe qPCR Master Mix (#M3004) untersucht. Die Effizienz der Reaktionen sowie der ΔCq wurden analysiert, (ΔCq = durchschnittlicher Cq der NTC (no template control) – durchschnittlicher Cq der geringsten Input-Menge). Die grüne Box markiert exzellente Performance nach den folgenden Kriterien: Effizienz = 90-110%, ΔCq ≥ 3). Weitere Informationen zu der „Dots in Boxes“ Darstellungen finden Sie hier.
LunaScript RT Master Mix (Primer-free) – das „universelle“ cDNA-Synthese Kit für viele Anwendungen
Durch die Zugabe verschiedener Primer zum LunaScript RT Master Mix (Primer frei), können Sie cDNAs herstellen, die für die unterschiedlichsten Downstream-Anwendungen, wie RT-qPCR, RT-PCR oder RNA-seq geeignet sind. Für RT-qPCR empfehlen wir eine Mischung aus random Hexamer und Oligo d(T) Primern zu verwenden. Um lange cDNAs herzustellen, eignet sich ein Oligo d(T) Primer.
LunaScript Multiplex One-Step RT-PCR Kit – Multiplex Detektion verschiedener RNAs in einer einzigen RT-PCR Reaktion
Das LunaScript Multiplex One-Step RT-PCR Kit ermöglicht Multiplex cDNA-Synthese und Amplifikation in einer einzigen Reaktion. Sie geben lediglich Ihr RNA-Template und gen-spezifische Primer hinzu. Amplifizierte Produkte können in Downstream-Anwendungen wie Next-Generation Sequencing, DNA-Arrays, Fragmentanalyse, Elektrophorese oder klassischen Klonierungs-/Sequenzierungs-Workflows eingesetzt werden.
Produkttabelle
Stand: 01.01.2024
Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.