Bis vor einigen Jahren dachte man, dass die Funktion von RNA in der Zelle lediglich darin besteht, die Translation genetischer Information von DNA in Protein zu gewährleisten. Die bislang bekannten Hauptarten von RNA waren: (A) Messenger-RNA, die die genetische Information der DNA in RNA umwandelt, (B) Transfer-RNA (tRNA), die mit spezifischen Aminosäuren beladen sind, und (C) ribosomale RNA (rRNA), eine Hauptkomponente des Ribosoms.
Neuere Untersuchungen jedoch zeigen, dass RNA mit einer Vielzahl von biologischen Prozessen in Verbindung steht, einschließlich Katalyse und Transkriptionsregulation. Die jüngsten technologischen Fortschritte und Verbesserungen in der RNA-Analyse und Detektion führten zur Entdeckung vieler neuer Klassen von kleinen und großen, nicht-kodierenden RNAs mit bislang unbekannten regulatorischen Funktionen. Beispiele hierfür sind microRNA (miRNA), zirkuläre RNA, lange nicht-kodierende RNA (lncRNA), kleine nukleoläre RNA (snoRNA) und extrazelluläre RNA (exRNA). Darüber hinaus haben neuentdeckte RNA-Modifikationen zusätzliche Komplexität von RNA aufgezeigt. Untersuchungen zur biologischen Relevanz und Auswirkungen der RNA-Modifikationen sind besonders spannende Forschungsgebiete der letzten Jahre. Sie haben zusammen mit den anderen Teilgebieten zu einer Renaissance der RNA-Forschung in der Biologie beigetragen.
Schlüsseltechnologien in der RNA Forschung sind beispielsweise die RNA Synthese für in vitro Studien oder Transfektionen. Auch die Modifikation von RNA und deren Prozessierung, die reverse Transkription von RNA zu cDNA routinemäßig angewandt z.B. für Klonierungen oder Expressionsanalysen, sowie die Detektion von RNA sind weitere Methoden, die die RNA-Forschung vorantreiben.
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NEBNext Ultra II Directional RNA Workflow
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In vitro Transkription und Capping der Gaussia Luciferase mRNA gefolgt von der Transfektion in HeLa-Zellen
Diese Methode besticht durch hohe in vitro-Ausbeuten von capped und uncapped mRNA aus dem linearisierten Plasmid, das das GLuc Gen enthält.
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