Die isothermale Amplifikation wird als einfache und kostengünstige Alternative zur PCR immer beliebter.
Was aber ist eigentlich LAMP (Loop-mediated isothermal Amplification) genau?
Die Loop-mediated isothermal amplification (LAMP, Schleifen-vermittelte isothermale DNA Amplifikation) verwendet vier bis sechs Primer, um ein bestimmtes DNA Fragment bei konstanter Temperatur zu amplifizieren. Hierfür benötigt man erstens eine DNA Polymerase mit starker Strangverdrängungsaktivität, zum Beispiel die Bst 3.0 DNA Polymerase. Zweitens werden ein Forward und ein Reverse Primer mit 5’ Überhängen versehen, die mit dem Amplicon hybridisieren und so zwei einzelsträngige DNA Schleifen (Loops) ausbilden. Diese dienen dann als Ausgangspunkte einer exponentiellen Amplifikation des gewünschten DNA Bereichs.
Schemazeichnung LAMP
- Keine PCR-Cycler notwendig
- Schnelle Protokolle
- Hohe Zuverlässigkeit & Spezifität
Wussten Sie schon, dass diese isothermale Amplifikations-Methode in nur 5-10 min ohne größere technische Hilfsmittel, wie PCR-Cycler oder ähnliches, durchgeführt werden kann?
Erfahren Sie dieses und mehr in unserem neuen Video-Tutorial “Overview of Loop-mediated isothermal Amplification”.
Im folgenden Übersichtsartikel (PDF-download) lesen Sie mehr über die vielfältigen Einsatzmöglichkeiten der LAMP-Methode:
Übrigens: Unsere (RT)-LAMP Reagenzien und Kits erhalten Sie bei Bedarf auch in kundenspezifischen Sonderformulierungen im Industriemaßstab!
Bei uns finden Sie sicher die Lösung für Ihr (RT)-LAMP-Projekt.
Gerne informieren wir Sie über die Möglichkeiten.
Prominente Anwendungen für die LAMP-Technologie:
Lesen Sie das Paper von Nathan Tanner (NEB) zur Coronavirus-Detektion mittels LAMP.
Mittels eines einfachen Farbumschlags die erfolgreiche isothermale Amplifikation visualisieren! Wie geht das?
Mit den praktischen WarmStart LAMP Kits von NEB werden Ihre LAMP-Experimente besonders einfach und zuverlässig:
NEB bietet Ihnen verschiedene Werkzeuge für Ihre LAMP/RT-LAMP Toolbox mit schnellen ~ 20 min Protokollen – optimal als alternative, schnelle und zuverlässige Analyse-Methode zur PCR in jedem Molekularbiologie-Labor oder aber auch in Feldversuchen oder DNA-Tests außerhalb eines Labors.
Für “universelle” Ansätze empfehlen wir dabei den WarmStart Multi-Purpose LAMP/RT-LAMP 2X Master Mix (with UDG). Dieser Master Mix nutzt die unerreichte Performance der WarmStart RTx sowie der Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase und ist kompatibel mit vielen Detektionsmethoden, inkl. Farbumschlag, Fluoreszenz, Trübung oder Agarosegel. Die Detektion der Amplifikation ist dabei pH-Wert-unabhängig. Daher ist der Mix auch für DNA- oder RNA-Proben in stark gepuffertem oder saurem Milieu einsetzbar!
Diesen “universellen” Master Mix erhalten Sie alternativ auch in der praktischen Kit-Variante WarmStart Fluorescent LAMP/RT-LAMP Kit (with UDG) für die Fluoreszenz-Detektion inkl. eines separaten Röhrchens 50x LAMP Fluorescent Dye.
- Zuverlässige Amplifikation von DNA oder RNA-Templates in nur 5-50 min!
- Einfache, isothermale Anwendung ohne PCR-Cycler
- Kompatibel mit verschiedenen Detektionsmethoden (wie Trübung, Fluoreszenz etc.) oder mit dem bloßen Auge durch Farbumschlag
Das WarmStart Multi-Purpose LAMP/RT-LAMP 2X Master Mix (with UDG) ist kompatibel mit vielen Detektionsmethoden, inkl. Farbumschlag, Fluoreszenz, Trübung oder Agarosegel.
Und mit den WarmStart Colorimetric LAMP 2x Master Mixes gelingt die Auswertung auch ohne Messgeräte dank einfacher visueller, pH-Wert-abhängiger Detektion.
Bei unseren colorimetrischen LAMP/RT-LAMP Kits ändert sich der pH-Wert der Reaktion durch den Einbau von dNTPs während der Amplifikation ins leicht saure Milieu. Daher kann die erfolgreiche Amplifikation mit einem besonders einfach zu detektieren sichtbaren Farbumschlag visualisiert werden.
Die colorimetrischen Kits finden daher oft Anwendung außerhalb des Labors, z. B. in der Patienten-nahen Coronavirus-Diagnostik (mehr…), in Felduntersuchungen zur Zikavirus-Detektion im Rahmen des World-Moscito-Programs (mehr…) oder sogar in Weltall.
Genes in Space: Diagnostische DNA Detektion ohne PCR – Erste erfolgreiche LAMP-Detektion im Weltall
Produkttabelle
Stand: 01.01.2024
Für weitere Informationen zum Thema LAMP besuchen Sie gerne unsere LAMP-Spezialseiten unter www.neb.com
Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.