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rCutSmart – NEB Puffer System

Der NEB rCutSmart Puffer:

rCutSmart = Clone Smart!

Mit NEB sind DNA Restriktion und Klonierungen einfach und bequem: Wir bieten Ihnen über 200 Restriktionsenzyme mit 100% Aktivität im gleichen Reaktionspuffer, dem rCutSmart Puffer. So sind Doppel- oder Mehrfachverdaus mit NEB besonders praktisch und komfortabel zu pipettieren.

Alle NEBuffer sowie der rCutSmart Puffer werden mit rekombinantem Albumin statt tierischem BSA ausgeliefert und sind damit “animal-free”.

Ihre CutSmart-Vorteile
  • Nur ein Reaktionspuffer
  • Weniger Pipettierschritte
  • Flexible Reaktionszeiten von 15 min
    bis über Nacht!
Und das Beste:

Viele von NEBs DNA-Modifikationsenzymen inkl. der Top 30 Klonierungsenzyme (z.B. DNA Ligase, Alkalische Phosphatase, Klenow ) etc. sind ebenfalls zu 100% im rCutSmart Buffer (siehe Tabelle) aktiv.

Technische Details

NEB ist Ihr Partner für Restriktionsenzyme!

Wählen Sie aus insgesamt über 280 unterschiedlichen Restriktasen, von denen über 200 mit dem rCutSmart Puffer als optimalem Reaktionspuffer für 100%ige Aktivität ausgeliefert werden.

Profitieren Sie von 100% Aktivität ohne unerwünschte Star-Aktivität!

Ob einzelne Reaktionsansätze, Doppel- oder Mehrfachverdaus – nie waren Ihre DNA-Restriktionen bequemer, einfacher und zuverlässiger!

NEBuffer Activity / Performance Chart

Eine aktuelle Online-Tabelle mit sämtlichen Restriktionsenzymen und deren Aktivitäten in den verschiedenen Puffern finden Sie hier:

Zur Online-Tabelle
Restriction Enzyme Chart

Haben Sie es gewusst? Über 200 unserer Restriktionsenzyme, davon über 150 Enzyme mit 100% Aktivität im rCutSmart Puffer, sind sind bei 65°C bzw. 80°C ganz einfach Hitze-inaktivierbar. So können Sie in vielen Fällen auf lästige Aufreinigungen verzichten und Pipettenspitze, Säulchen und Zeit sparen!

Zur Übersichtstabelle

Bestellen Sie sich das aktuelle NEB Buffer Chart Poster mit allen Pufferbedingungen und Hinweisen zu den Restriktionsenzymen inkl. Hitze-Inaktivierung kostenfrei für Ihr Labor:

Poster anfordern
Performance_Chart_Poster_2021

Technische Details

Aktivität DNA modifizierender Enzyme in rCutSmart Puffer

Enzym Aktivität in CUTSMART Benötigter Zusatz
Ligasen:
T4 DNA Ligase + + + benötigt ATP
E. coli DNA Ligase + + + benötigt NAD
T3 DNA Ligase + + + benötigt ATP + PEG
T7 DNA Ligase + + + benötigt ATP + PEG
Hi-T4™ DNA Ligase + + + benötigt ATP
Salt-T4® DNA Ligase + benötigt ATP
Polymerasen:
T4 DNA Polymerase + + +
DNA Polymerase I, Large (Klenow) Fragment + + +
DNA Polymerase I + + +
DNA Polymerase Klenow Exo– + + +
Bst DNA Polymerase + + +
phi29 DNA Polymerase + + + benötigt DTT
T7 DNA Polymerase (unmodified) + + +
Transferasen/Kinasen:
T4 Polynucleotide Kinase + + + benötigt ATP + DTT
T4 PNK (3´ phosphatase minus) + + + benötigt ATP + DTT
CpG Methyltransferase (M. SssI) + + +
GpC Methyltransferase (M. CviPI) + benötigt DTT
T4 Phage ß-glucosyltransferase (T4-BGT) + + +
Nukleasen, andere:
Endonuclease III (Nth), recombinant + + +
Endonuclease VIII + + +
Exonuclease III + + +
Micrococcal Nuclease + + + benötigt Ca2+
Nuclease BAL-31 + + +
T7 Exonuclease + + +
USER Enzyme, recombinant + + +
DNaseI (RNase-free) + + + benötigt Ca2+
Exonuclease I + + +
Exonuclease V (Rec BCD) + + +
Exonuclease VII + + +
Lambda Exonuclease + +
RecJf + + +
T5 Exonuclease + + +
Thermolabile ExoI + + +
Glycosylasen:
Fpg + + +
Phosphatasen:
Alkaline Phosphatase (CIP) + + +
Antarctic Phosphatase + + + benötigt Zn2+
Shrimp Alkaline Phosphatase (rSAP) + + +
Quick CIP + + +
+ + + volle Aktivität + + 50–100% Aktivität + 0–50% Aktivität

TechTipp!

Alle wichtigen DNA-modifizierenden Enzyme von NEB sind zu 100% im rCutSmart Puffer aktiv. Einige benötigen für vollständige Aktivität allerdings noch einen Zusatz (z.B. ATP).

Dazu supplementieren Sie einfach den Ansatz mit dem jeweiligen mitgelieferten Reaktionspuffer des modifizierenden Enzyms  (in 1x finaler Konzentration) – fertig!

Keine Aufreinigung, keine Verluste, keine zusätzlichen Arbeitsschritte!

Angebot:

NEB Quick Cloning Box-HF

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FAQs (klicken Sie hier)

F. Verändert die Umstellung auf das neue rCutSmart-Puffersystem die Eigenschaften der Restriktionsenzyme?
A. Die Eigenschaften der Restriktionsenzyme bleiben gleich. Das Vorhandensein von rekombinanten BSA in den neuen NEBuffern (inkl. rCutSmart) bzw. im Enzymstock versus dem nativen BSA in den alten Formulierungen hat keinen Einfluss auf die Performance.

F. Warum sind nicht alle Restriktionsenzyme in dem rCutSmart-Puffer verfügbar?
A. Einige Enzyme benötigen Puffer mit hohen Salzkonzentrationen, der rCutSmart-Puffer hingegen hat nur eine geringe Salzkonzentration. Über 200 Enzyme haben eine 100%ige Aktivität, wenn sie im rCutSmart-Puffer eingesetzt werden, für die „Hochsalz“-Enzyme entnehmen Sie die besten Bedingungen der NEB Aktivitäts-Tabelle.

F. Funktionieren DNA-modifizierende Enzyme ebenfalls im rCutSmart™-Puffer?
A. NEB hat viele modifizierende Enzyme getestet, die während eines Klonierungsprozesses zur Anwendung kommen können. Wir konnten zeigen, dass die meisten dieser Enzyme eine 100%ige Aktivität im rCutSmart-Puffer entfalten. Für nähere Informationen werfen Sie doch bitte einen Blick auf die getesteten, modifizierenden Enzyme.

F. Kann ich einen Verdau mit Time-Saver™ Enzymen nur 5-15 Minuten inkubieren lassen, oder kann ich auch länger verdauen?
A. NEB Time-Saver™ Enzyme haben den Vorteil, dass sie schnell arbeiten und ein Verdau innerhalb von 5-15 Minuten abgeschlossen ist. Time-Saver™ Enzyme haben aber auch den Vorteil, dass eine längere Inkubationszeit, bis hin zu einer Inkubation über Nacht, keinen Qualitätsverlust für Ihre DNA bedeutet.

Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.