Proteinexpression

It’s a matter of expression.

Für eine Vielzahl von wissenschaftlichen Fragestellungen ist es notwendig, Proteine in den unterschiedlichsten Mengen rekombinant und in hoher Reinheit herzustellen. Die grundlegende Vorgehensweise ist dabei recht einfach. Meist wird die das Protein codierende DNA in einen Expressionsvektor kloniert und anschließend in einem geeigneten Zellsystem exprimiert.

In der Praxis ist die Proteinexpression aber ein komplexer Prozess, dessen Erfolg von vielen Faktoren abhängig ist. So beeinflusst der gewählte Expressions-Organismus maßgeblich die Faltung des Proteins, die post-translationale Modifikation oder die Lokalisation in ein Membrankompartiment. Auch können Proteine für die Wirtszelle toxisch sein, was eine Expression in größerem Maßstab erschwert.

Video: Expression komplexer Proteine

Nutzen Sie NEBExpress Produkte für Ihre Expressions- und Aufreinigungs-Ansätze. Denn mit jedem NEBExpress Produkt erhalten Sie auch direkten Zugang zu unseren Wissenschaftlern mit über 40 Jahren Erfahrung in der Entwicklung und Anwendung von Technologien zur Protein Expression. Denn wir setzen die NEBExpress Lösungen in unseren eigenen Forschungs- und Herstellungsprozessen ein und wissen genau: Qualität und Performance sind entscheidend! Daher werden alle unsere Produkte strengstens kontrolliert, damit Sie und wir selbst sicher und zuversichtlich arbeiten können!

Original-Artikel

Over 40 years in protein expression and purification – a historical perspective

Over 40 years in protein expression and purification – a historical perspective

PDF Downloads

Systeme für die Protein Expression:

NEB bietet Ihnen verschiedene Komplett-Systeme für die Expression rekombinanter Proteine.

Zellfreie Systeme für die Expression analytischer Proteinmengen:

Für die Expression und Aufreinigung großer Proteinmengen:

  • NEBExpress MBP Fusion and Purification System – Komplettsystem zur Expression & Aufreinigung von großen Mengen löslichen Proteins mittels Affinitätstag-Chromatographie
  • IMPACT Kit – Ermöglicht eine Ein-Schritt-Aufreinigung des exprimierten Proteins unter Abspaltung des Fusions-Tags
  • Nutzen Sie unsere Protein Standards für die Analyse – erhältlich in verschiedenen Formulierungen.

Optimierte Wirtszellen für die Proteinexpression:

  • Entdecken Sie unsere kompetenten Zellen für die Proteinexpression, sowohl für  E. coli als auch  Kluyveromyces lactis (K. lactis, Hefe) Systeme.

Eukaryotische Protein Expression:

Proteinaufreinigung mit unseren Magnetischen Beads, Säulen und Harzen

Protein Expression und Purification Selection Chart

Application Kit Advantages
High-Yield Expression pMAL™ Protein Fusion and Purification System Substantial yields (up to 100 mg/L) in more than 75% cases tested; uses the strong Ptac promoter.
K. lactis Protein Expression Kit Uses the strong LAC4 promoter; multiple integrations of plasmid results in higher yield.
IMPACT™ Kit Uses the T7 promoter for high level regulated expression.
Cell-Free Expression PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Quickly generates analytical amounts of protein.
Co-Expression of Multiple Proteins K. lactis Protein Expression Kit Easily co-express 2–4 proteins.
PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Bicistronic constructs or multiple plasmids with appropriate transcription and translation regulatory elements can be used.
Enhanced Solubility pMAL™ Protein Fusion and Purification System Fusion to MBP enhances solubility of proteins in E. coli.*
K. lactis Protein Expression Kit Utilizes K. lactis eukaryotic folding pathway.
Affinity Tag Chromatography IMPACT™ Kit Utilizes an intein-chitin binding domain (CBD) tag on either the N- or C- terminus, offering single-step purification.
pMAL™ Protein Fusion and Purification System Fusion to MBP allows for purification on amylose resin.
K. lactis Protein Expression Kit Vectors are sold separately that generate fusions to MBP allowing for purification on amylose restin.
Post-translational Modification K. lactis Protein Expression Kit Secretion of both N- and O- glycosylated proteins.
Periplasmic Expression pMAL™ Protein Fusion and Purification System Periplasmic expression enhances folding of proteins with disulfide bonds.
Secreted Expression K. lactis Protein Expression Kit Eliminates cell lysis step, simplifying purification.
Toxic Proteins K. lactis Protein Expression Kit Secretion of protein from the cell.
IMPACT™ Kit Can express the toxic gene in two pieces and ligate proteins together using intein mediated protein ligation (IPL).
pMAL™ Protein Fusion and Purification System Can export toxic proteins into periplasmic space.
PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Cell-free environment not affected by “toxicity” of expressed protein.
Protein Modification IMPACT™ Kit Generates proteins with reactive ends (N-terminal cysteine and/or C-terminal thioester) allowing for labeling or ligation of proteins or peptides.
PURExpress® In Vitro Protein Synthesis Kit Allows introduction of modified, unnatural or labeled amino acids.
No Additional Amino Acid Residues IMPACT™ Kit Start of native protein is fused adjacent to site of intein cleavage.
pMAL™ Protein Fusion and Purification System Start of protein is fused adjacent to protease site.

Weiterführende Informationen finden Sie unter Technische Ressourcen oder auf neb.com. Informationen zu Namensrechten finden Sie hier.